環凱培養基的配置要經過一系列的步驟，分別是：配料、溶解、調PH、過濾以及分裝、包扎、滅菌、擺斜面、貯存，其中：

1、配料：配方換算→在容器中加入少量水（蒸餾水，自然水）→按照配方稱取各種藥品（依次加入）→加足所需水量（一藥一勺，取藥后立即蓋上瓶蓋）。

2、溶解：淀粉溶解：少量冷水調成糊狀，加熱溶解，特別是加有瓊脂的培養基，一定要煮沸，瓊脂的熔解溫度95-97℃ ，且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。

3、調PH：用1N的鹽酸或1N的 NaOH把培養基調節到所要求的值。

4、過濾：濾紙或棉花進行過濾。

5、分裝：一般培養基放在三角瓶或試管中滅菌使用。1）三角瓶：若作靜置培養，則100ml培養基/250ml的三角瓶，zui多不能超過150ml培養基/250ml的三角瓶，否則滅菌時培養基沸騰容易污染棉塞，造成染菌；若作搖瓶培養，則15-20ml培養基/250ml的三角瓶，保證通氣良好。

2）試管分裝：液體培養基一般裝4-5ml，約試管的1/4高度；固體斜面培養基一般裝3-4ml，約試管的1/5高度。

6、包扎：分裝好后，塞上棉塞，在用牛皮紙將棉塞包裹好，防止滅菌時水份進入把棉塞弄濕。

7、滅菌：按配方上要求的溫度、壓力進行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高，營養成分會被破壞，培養基中的糖、氨基酸會使培養基的顏色變深。

8、擺斜面：滅菌后需要擺斜面的試管要趁熱斜著擺放，使其凝固成為一個斜面，約占試管長度的1/2。

9、貯存：環凱培養基在30℃下放置一天，無污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用。